Obiettivi

Acquisizione delle conoscenze di base riguardanti la struttura e la funzione degli acidi nucleici. Acquisizione delle principali metodiche utilizzate per la purificazione e l'analisi delle proteine, per l'espressione di proteine ricombinanti e la produzione di anticorpi monoclonali.

Contenuti

Struttura e replicazione del DNA. Agenti mutageni e sistemi di riparo del DNA.

Struttura, sintesi e maturazione dell'RNA. Sintesi proteica. Controllo dell'espressione genica nei procarioti.

Estrazione e purificazione degli acidi nucleici, analisi del genoma mediante l'uso di enzimi di restrizione, tecniche di clonaggio,amplificazione del DNA mediante PCR e metodi per determinare la sequenza del DNA. Espressione di proteine ricombinanti. Mutagenesi sito specifica.

Studio dei costituenti cellulari: metodi di omogeneizzazione di tessuti e di separazione dei costituenti subcellulari. Colture cellulari. Produzione di anticorpi monoclonali.

Estrazione e purificazione di macromolecole proteiche mediante tecniche cromatografiche. Tecniche elettroforetiche e di isoelettrofocalizzazione, western blotting.

Esercitazioni pratiche

Sono previste 15 ore di laboratorio riguardanti le principali tecniche per lo studio delle proteine e del DNA.